约附近100元3小时微信,国产精品污www一区二区三区,韩国公妇里乱片a片,年轻的母亲在线观看

當(dāng)前位置:主頁 > 技術(shù)文章 > 四種細(xì)胞破碎的方法

四種細(xì)胞破碎的方法

更新時(shí)間:2019-10-10 點(diǎn)擊次數(shù):15988

一、機(jī)械破碎法:是指利用搗碎機(jī)、研磨器或勻漿器 等將細(xì)胞破碎開來 。


1. 高速組織搗碎:將材料配成稀糊狀液,放置于筒內(nèi)約1/3體積,蓋緊筒蓋,將調(diào)速器先撥至慢處,開動(dòng)開關(guān)后,逐步加速至所需速度。此法適用于動(dòng)物內(nèi)臟組織、植物肉質(zhì)種子等。


2. 玻璃勻漿器勻漿:先將剪碎的組織置于管中,再套入研桿來回研磨,上下移動(dòng),即可將細(xì)胞研碎,此法細(xì)胞破碎程度比高速組織搗碎機(jī)為高,適用于量少和動(dòng)物臟器組織。


二、物理破碎法:指利用溫度差、壓力差或超聲波等將細(xì)胞破碎開來。


1.用一定功率的超聲波處理細(xì)胞懸液,使細(xì)胞急劇震蕩破裂(借助超聲的震動(dòng)力破碎細(xì)胞壁和細(xì)胞器)。
機(jī)制:可能與強(qiáng)聲波作用溶液時(shí),氣泡產(chǎn)生、長大和破碎的空化現(xiàn)象有關(guān),空化現(xiàn)象引起的沖擊波和剪刀力使細(xì)胞裂解。
超聲波破碎的效率取決于聲頻、聲能、處理時(shí)間、細(xì)胞濃度和細(xì)胞類型等。(使用時(shí)注意降溫,防止過熱)。


2. 高壓破碎:細(xì)胞懸浮液從高壓室的環(huán)狀隙噴射到靜止的撞擊環(huán)上,被迫改變方向經(jīng)出口管流出。此過程中細(xì)胞經(jīng)歷了高速造成的剪切的碰撞及高壓到常壓的變化,從而破碎釋放內(nèi)含物。
這是一種溫和的、*破碎細(xì)胞的較理想的方法。


3. 反復(fù)凍融法:將細(xì)胞在-20度以下冰凍,室溫融解,反復(fù)幾次,由于細(xì)胞內(nèi)冰粒形成和剩余細(xì)胞液的鹽濃度增高引起溶脹,使細(xì)胞結(jié)構(gòu)破碎。


三、化學(xué)破碎法:指利用甲醛、丙酮等有機(jī)溶劑或表面活性劑作用于細(xì)胞膜,使細(xì)胞膜的結(jié)構(gòu)遭到破壞或透性發(fā)生改變 。


有些動(dòng)物細(xì)胞,例如腫瘤細(xì)胞可采用十二烷基磺酸鈉(SDS)、去氧膽酸鈉等細(xì)胞膜破壞。濃度一般為1mg/ml。


四、酶學(xué)破碎法 :選用合適的酶,使細(xì)胞壁遭到破壞,進(jìn)而在低滲溶液中將原生質(zhì)體破碎開來。
細(xì)菌細(xì)胞壁較厚,可采用溶菌酶處理效果更好。
裂解液標(biāo)準(zhǔn)配方: :50mM Tris-HCl(pH8.5~9.0), 2mM EDTA, 100mM NaCl, 0.5% Triton X-100, 1mg/ml溶菌酶。(溶菌酶在這個(gè)pH范圍內(nèi)比較好發(fā)揮作用) 。


綜合敘述:無論用哪一種方法破碎組織細(xì)胞,都會(huì)使細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)或核酸水解酶釋放到溶液中,使大分子生物降解,導(dǎo)致天然物質(zhì)量的減少,加入二異丙基氟磷酸(DFP)可以抑制或減慢自溶作用;加入碘乙酸可以抑制那些活性中心需要有疏基的蛋白水解酶的活性,加入PMSF也能清除蛋白水解酶活力,但不是全部,而且應(yīng)該在破碎的同時(shí)多加幾次;另外,還可通過選擇pH、溫度或離子強(qiáng)度等,使這些條件都要適合于目的物質(zhì)的提取。

掃一掃,加微信

版權(quán)所有 © 2025北京來亨科學(xué)儀器有限公司
備案號:京ICP備2024080360號-1 技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng) 管理登陸 sitemap.xml

亚洲午夜精品a片久久www慈禧| 久久艳务乳肉豪妇荡乳a片| 久久综合AV色老头免费观看| 国产午夜福利100集发布| 久久国产精品二国产精品| 农村嫖妓chinese城中村| 男主骗女主帮她发育h | 金刚狼在线观看| 色婷婷亚洲精品综合影院| 亚洲gv猛男gv无码男同短文| 国模沟沟茂密的森林| 精品人妻无码一区二区三区绿| 毛片亚洲av无码精品国产午夜| 久久AV无码AV喷吹AV高潮| 潘金莲被武松高潮八次小说| 成人无码区在线观看| 亚洲综合小说另类图片动图| 对白脏话肉麻粗话av| 黑人巨大两根一起挤进A片| 色欲久久精品无码一区二区三区| 欧美日韩精品一区二区在线播放 | 欧美牲交a欧美牲交| 一本久道中文无码字幕av| 边啃奶头边躁狠狠躁| 张柏芝阿娇全套无删减1313| 国产精品视频23区AV| 亚洲熟妇色自偷自拍另类| 亚洲电影在线观看| 人妻借种太粗进不去| 性久久久| 男女做爰的全部过程a片| 久久久久久精品免费看a片| 躁躁躁日日躁| 最刺激的交换夫妇中文字幕| 师徒高辣h文1v1| 最近中文字幕高清字幕| 暴虐sm灌浣肠调教a片男男| 卧室里传出肉体撞击声| 欧美多人乱大交xxxxx变态| 成人毛片18女人毛片免费看视频| 男女免费观看做爰视频在线观看|